莫氏巴貝斯蟲PCR試劑盒使用步驟

莫氏巴貝斯蟲PCR試劑盒使用方法：
注：莫氏巴貝斯蟲PCR試劑盒說明書所有試劑使用前需*解凍，混合均勻，6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理（樣本處理區(qū)）
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動(dòng)化核酸提取儀等，具體提取方法請(qǐng)參照相關(guān)說明書；陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取，可直接使用。
2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備（PCR前準(zhǔn)備區(qū)）
取N個(gè)（N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品）PCR反應(yīng)管，每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量，兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)PCR反應(yīng)管)。
組分每頭份用量FMD  RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s，轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣（樣本處理區(qū)）
3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl，蓋緊管蓋，于6,000rpm離心10s，轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。
技術(shù)特點(diǎn)：
1莫氏巴貝斯蟲PCR試劑盒說明書準(zhǔn)確可靠，臨床雙盲對(duì)照試驗(yàn)＞1000例，結(jié)果與金標(biāo)準(zhǔn)測序法比對(duì)，結(jié)果*性大于99%。
2高靈敏：可檢測低至10ng的人基因組DNA。
3快速：整個(gè)檢測流程只需3小時(shí)。
4簡便：試劑盒提供預(yù)混好的試劑，使體系配置操作簡便。
5防污染
6高特異性：雙重特異性組成，保證檢測結(jié)果的特異性和準(zhǔn)確性引物與DNA互補(bǔ)鏈結(jié)合必需*配對(duì)，才能延伸。探針特異性與所檢測基因的PCR產(chǎn)物配對(duì)，在延伸中產(chǎn)生熒光。